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來(lái)自結(jié)直腸癌的病人類器官原代培養(yǎng)

更新時(shí)間:2024-04-19      點(diǎn)擊次數(shù):818
一密度增加、操作步驟

1.組織 4℃ 條件下從醫(yī)院取回創新為先。
2.消毒取樣的 15ml 管開放以來,取出組織推進高水平,放到 10ml 大皿中不折不扣。
3.用含 4 抗的 PBS 溶液浸泡講故事,清洗組織兩個角度入手。
4.再用組織緩沖液浸泡去創新、清洗三遍成效與經驗。
5.將組織剪成 1mm3 大小的組織塊適應性,轉(zhuǎn)移到 15ml 管中消化。
6.在 37℃ 水浴鍋中稍有不慎,消化 15min重要作用。
7.取少量液體在顯微鏡下觀察,看到較多的單細(xì)胞和較少的細(xì)胞簇后最為顯著,終止消化尤為突出。
8.用 100μm 篩過(guò)濾,然后 300g4℃ 離心 5min環境,移去上清空間載體。
9.重懸沉淀,轉(zhuǎn)移到 2ml 離心管中相對簡便,300g4℃ 離心 5min重要組成部分,移去上清。
10.估算沉淀的細(xì)胞量表現,以 1:25 的比例添加基質(zhì)膠特點,重懸。
11.24 孔板鋪板結論,冰上操作和諧共生,每孔點(diǎn)膠 25ul。
12.鋪板后適應性強,放到 37℃ 細(xì)胞培養(yǎng)箱中 15min 成膠技術交流。

13.然后每孔添加 600ul 結(jié)直腸癌類器官培養(yǎng)基,放到 37℃ 細(xì)胞培養(yǎng)箱中建設。


二在此基礎上、結(jié)果展示

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