神經(jīng)元原代培養(yǎng)是一種將胚胎哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的部分組織,如大腦皮層、海馬提升行動、脊髓腦組織等結構,直接取出后在體外進行接種培養(yǎng)的方法。是將胚胎哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的組織取出后大部分,在體外進行培養(yǎng)和研究的實驗技術(shù)。主要用于研究神經(jīng)元的生物學(xué)特性、神經(jīng)發(fā)生順滑地配合、神經(jīng)退行性疾病的機理等。
1應用優勢、準備實驗材料:包括培養(yǎng)基高質量發展、細胞培養(yǎng)試劑、培養(yǎng)器具等高效節能。
2影響力範圍、取材:通過異交法得到小鼠胚胎,在胚胎發(fā)育第15-17天時取材新創新即將到來。
3邁出了重要的一步、分離大腦皮層組織:將小鼠胚胎處死后,迅速取出大腦并置于無菌的PBS緩沖液中。移除大腦的外圍組織需求,僅保留皮層組織堅定不移。
4、組織消化:將皮層組織切碎成小塊更讓我明白了,加入含有0.05%胰蛋白酶和0.1%DNA酶的消化液迎難而上,室溫下消化15-20分鐘。
5探索、離心與清洗:將消化液中的細胞懸液離心處理堅持先行,用PBS緩沖液洗滌1-2次,去除消化液中的酶和雜質(zhì)滿意度。
6情況較常見、細胞計數(shù)與分裝:通過顯微鏡和細胞計數(shù)板對細胞懸液進行計數(shù),稀釋并分裝得到所需細胞濃度主要抓手。
7體製、接種:將細胞懸液接種到預(yù)先涂覆了聚-L-賴氨酸的培養(yǎng)皿中,使細胞均勻附著在培養(yǎng)皿表面創新科技。
8服務延伸、添加培養(yǎng)基:加入預(yù)先配制好的培養(yǎng)基,為細胞提供營養(yǎng)和生長因子高效流通。
9調解製度、培養(yǎng)條件控制:將培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中,保持37°C統籌發展、95%濕度和5%CO?濃度深化涉外。定期更換培養(yǎng)基以維持細胞生長。