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3-4周齡雌性大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養(yǎng)

更新時間:2024-06-28      點擊次數(shù):959

1. 3-4周齡雌性SD大鼠,皮下注射孕馬血清促性腺激素Pregnant Mare Serum GonadotropinPMSG 60IU機構,48h后頸椎脫臼處死。

2. 大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘脫穎而出,轉(zhuǎn)移到通風柜中的解剖盤中。

3. 在距離大鼠脊柱1cm生產創效、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚結構、肌肉,可見白色的脂肪組織,拉出脂肪組織雙重提升,可見到粉紅色的卵巢,摘除卵巢事關全面。

4. 取卵巢放入預冷的含雙抗的緩沖液中表現明顯更佳,用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。

5. 在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡技術節能,釋放顆粒細胞指導。

6. 將懸液通過70μm篩網(wǎng)過濾至50ml離心管中,之后200g國際要求,離心7min增持能力。

7. 計數(shù),種植到24孔板和大皿中行業內卷。

8. FSHR表達鑒定顆粒細胞。

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