脊髓神經(jīng)元原代培養(yǎng)是一種將胚胎哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的脊髓組織直接取出技術的開發,并進(jìn)行接種培養(yǎng)的方法全面革新。其主要目的是獲取高度分化的脊髓神經(jīng)元細(xì)胞,用于研究神經(jīng)源性疾病的發(fā)病機(jī)制先進的解決方案、進(jìn)程產業,以及神經(jīng)細(xì)胞的發(fā)育狀況和生理活性滿意度。
1、取材:通常選擇胎鼠或新生鼠的脊髓作為培養(yǎng)材料可持續,因為這些時期的脊髓神經(jīng)元具有較高的增殖能力和分化潛力主要抓手。取材過程需要在無菌條件下進(jìn)行,以避免污染。
2創新科技、組織處理:將取出的脊髓組織進(jìn)行仔細(xì)剝離服務延伸,去除脊膜及血管,然后剪成小塊具有重要意義,以便后續(xù)消化進一步。
3、消化與分散:使用胰蛋白酶等消化酶將脊髓組織消化成單個細(xì)胞懸液強大的功能。消化過程中需要控制消化時間和溫度實際需求,以避免對細(xì)胞造成損傷。
4的特性、接種與培養(yǎng):將消化后的細(xì)胞懸液接種到預(yù)先涂有PLL等促進(jìn)細(xì)胞貼壁的物質(zhì)的培養(yǎng)板中交流,然后置于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)提供堅實支撐。培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)基還不大,以保持細(xì)胞的生長環(huán)境。
脊髓神經(jīng)元原代培養(yǎng)的培養(yǎng)條件:
1信息化技術、溫度:通常維持在37℃左右力度,以模擬細(xì)胞在體內(nèi)的生長環(huán)境。
2系統性、氣體環(huán)境:需要提供5%CO2的氣體環(huán)境,以維持細(xì)胞的酸堿平衡和生長所需的氧氣濃度單產提升。
3傳遞、培養(yǎng)基:通常使用含有胎牛血清、阿糖胞苷等營養(yǎng)成分的DMEM培養(yǎng)基勞動精神,以支持脊髓神經(jīng)元的生長和分化開展攻關合作。