表觀轉(zhuǎn)錄因子 PCIF1 調(diào)控 CD8+ T細(xì)胞鐵死亡與激活流程，為腫瘤免疫治療開辟新靶點(diǎn)

《The epitranscriptional factor PCIF1 orchestrates CD8+ T cell ferroptosis and activation to control antitumor immunity》是 2025 年發(fā)表在《Nature Immunology》上的一篇文章要落實好， PCIF1是一種表觀轉(zhuǎn)錄因子，通過調(diào)控RNA的m6A_m修飾，在CD8⁺T細(xì)胞的抗腫瘤免疫反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用不斷發展。研究發(fā)現(xiàn)，PCIF1在CD8⁺T細(xì)胞中具有抑制性作用進一步意見，其缺失能夠增強(qiáng)T細(xì)胞的抗腫瘤活性改善，從而提高免疫治療的效果。

一進一步提升、         研究背景

近年來空間廣闊，T細(xì)胞免疫療法作為一種新興的細(xì)胞免疫療法，在癌癥治療領(lǐng)域取得了顯著的突破改革創新，為患者帶來了新的希望知識和技能。然而，目前的治療效果在持久性方面仍存在一定的局限性新模式，需要深入探究其內(nèi)在分子機(jī)制以進(jìn)一步優(yōu)化治療方案特征更加明顯。研究發(fā)現(xiàn)，通過靶向關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄或表觀轉(zhuǎn)錄因子講理論，可以顯著增強(qiáng)T細(xì)胞的抗腫瘤功能的可能性，從而提升免疫治療的整體效果。

表觀轉(zhuǎn)錄組學(xué)作為當(dāng)前生物學(xué)領(lǐng)域的一個新興分支服務為一體，主要聚焦于RNA修飾及其在基因表達(dá)調(diào)控中的重要作用問題。其中，m6Am（N6,2'-O-二甲基腺苷）作為一種重要的RNA修飾進行培訓，是真核生物mRNA帽端的修飾之一發展機遇。在生物學(xué)過程中，m6Am修飾在基因表達(dá)調(diào)控中扮演著關(guān)鍵角色法治力量，它可以影響mRNA的穩(wěn)定性全技術方案、翻譯效率以及剪接等過程，從而精細(xì)地調(diào)控基因表達(dá)共享。

在該篇文章中信息化，研究人員發(fā)現(xiàn)m6A_m修飾通過 PCIF1 這一甲基轉(zhuǎn)移酶來實(shí)現(xiàn)，PCIF1 催化 m6A_m沉積在 mRNA 的 5' 端生動，從而調(diào)控基因表達(dá)新型儲能。研究發(fā)現(xiàn)，Pcif1 缺失會導(dǎo)致 m6Am 修飾的靶基因（如鐵死亡抑制基因 Fth1新品技、Slc3a2 和 T 細(xì)胞激活基因 Cd69）表達(dá)增加範圍，進(jìn)而賦予 CD8+ T細(xì)胞對鐵死亡的抗性和增強(qiáng)其激活能力，最終增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)紮實做。

二空間廣闊、         研究結(jié)果

1)       提高 Pcif1 基因缺失小鼠的腫瘤免疫力

為探究PCIF1在體內(nèi)調(diào)控抗腫瘤免疫的生理作用，研究人員構(gòu)建了全身性Pcif1敲除小鼠（Pcif1 KO），通過將Pcif1^fl/fl小鼠與CAG-Cre轉(zhuǎn)基因小鼠雜交服務品質，刪除Pcif1基因15個編碼外顯子中的10個（外顯子5-14）戰略布局，在C57BL/6背景下生成Pcif1 KO小鼠。分子檢測證實(shí)其脾臟表現明顯更佳、肺狀態、心臟和肝臟中Pcif1蛋白缺失，且該敲除小鼠在8周齡時體重指導、肝功能廣泛認同、血常規(guī)及T細(xì)胞亞群組成與野生型（WT）小鼠均無顯著差異，表現(xiàn)出正常生存能力和繁殖能力流動性。進(jìn)一步通過LLC鍛造、B16-F10和MC38同基因腫瘤模型發(fā)現(xiàn)，Pcif1 KO小鼠的腫瘤生長速度顯著減緩持續創新，生存期顯著延長改善，表明Pcif1缺失可抑制多種腫瘤模型的生長并延長宿主存活時間。

2)       Pcif1 KO 可通過 CD8+ T_eff細(xì)胞提高抗腫瘤免疫力

為探究PCIF1在抗腫瘤免疫中的作用喜愛，研究人員構(gòu)建了全身性Pcif1 KO和T細(xì)胞特異性敲除小鼠（Pcif1 cKO）重要的角色。通過scRNA-seq和流式細(xì)胞術(shù)分析發(fā)現(xiàn)，Pcif1缺失顯著增加TME中CD8+ T細(xì)胞比例及效應(yīng)細(xì)胞因子IFNγ向好態勢、TNF平臺建設、Gzmb分泌，并促進(jìn)PD-1⁺Tcf-1⁺干性貢獻力量、CD44⁺CD8⁺記憶性T細(xì)胞亞群使用、CD69⁺CD103⁺CD8⁺組織駐留記憶T細(xì)胞的富集，同時減少耗竭型PD-1⁺Tim3⁺CD8⁺T細(xì)胞發行速度。選擇性耗竭實(shí)驗(yàn)證實(shí)更加堅強，CD8⁺T細(xì)胞是Pcif1 KO小鼠腫瘤生長抑制的關(guān)鍵因素。T細(xì)胞特異性敲除模型進(jìn)一步驗(yàn)證性能，Pcif1缺失通過增強(qiáng)T細(xì)胞抗腫瘤免疫應(yīng)答初步建立，顯著抑制LLC腫瘤和B16-F10黑色素瘤的生長并延長生存期。這些發(fā)現(xiàn)為以下觀點(diǎn)提供了證據(jù)：TME 中腫瘤浸潤 CD8⁺T_eff細(xì)胞的增加有助于增強(qiáng) Pcif1 cKO 小鼠的抗腫瘤免疫反應(yīng)組建。

3)       PCIF1 通過 m⁶A_m修飾調(diào)節(jié) CD8⁺T 細(xì)胞活化

研究發(fā)現(xiàn)各有優勢，Pcif1 缺失通過增強(qiáng) TCR信號通路活性顯著提升 CD8⁺T 細(xì)胞的體外激活水平及細(xì)胞毒性功能，Pcif1 KO小鼠 CD8⁺T 細(xì)胞在抗CD3/CD28 抗體刺激后重要的意義，活化標(biāo)志物 CD69 的表達(dá)量及效應(yīng)因子 IFNγ、TNF等多個領域、Gzmb 的分泌水平均顯著高于WT細(xì)胞再獲，且 TCR 通路關(guān)鍵分子 LCK 和 LAT 的磷酸化水平顯著增強(qiáng)。進(jìn)一步機(jī)制研究表明，Pcif1 的 m?A_m甲基轉(zhuǎn)移酶活性是其抑制 CD8⁺T 細(xì)胞激活的關(guān)鍵體驗區，催化失活突變體（Asn552Ala）無法逆轉(zhuǎn) Pcif1 敲除導(dǎo)致的 CD8+ T細(xì)胞過度活化增多，而野生型 Pcif1 的異位表達(dá)可有效恢復(fù)細(xì)胞因子分泌及 mRNA 表達(dá)水平，這些結(jié)果表明有望，PCIF1 主要通過其 m⁶A^m甲基轉(zhuǎn)移酶活性抑制 CD8⁺T 細(xì)胞的活化進一步推進。

4)       鑒定 CD8⁺T 細(xì)胞中的 Pcif1 下游靶標(biāo)

研究揭示了PCIF1通過其m?A_m甲基轉(zhuǎn)移酶活性調(diào)控CD8⁺T細(xì)胞激活與鐵死亡的機(jī)制。代謝標(biāo)記與TMT-MS分析顯示方案，Pcif1敲除CD8⁺T細(xì)胞整體蛋白翻譯未顯著變化應用的選擇，但有312個差異表達(dá)蛋白，涉及鐵死亡和T細(xì)胞毒性通路左右。m?A_m測序確認(rèn)Pcif1敲除使m?A_m水平下降背景下，影響特定靶點(diǎn)如Fth1、Slc3a2和Cd69的蛋白表達(dá)長期間，但mRNA水平不變基本情況，表明翻譯調(diào)控。PRM高端化、WB和RIP實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)Pcif1通過m?A^m修飾抑制這些蛋白的翻譯力量。盡管CTBP2在其他情境下參與m?A_m調(diào)控，但在CD8⁺T細(xì)胞中非必需提單產。IP-MS分析發(fā)現(xiàn)Pcif1與蛋白質(zhì)翻譯和mRNA加工相關(guān)因子相互作用提升行動。功能實(shí)驗(yàn)表明，Pcif1缺失使CD8+ T細(xì)胞鐵含量降低關註、GSH和胱氨酸水平升高研究進展，增強(qiáng)對鐵死亡誘導(dǎo)劑的抵抗力，主要通過上調(diào)Fth1和Slc3a2等基因的蛋白表達(dá)實(shí)現(xiàn)連日來。綜上研究結(jié)果表明快速融入，Pcif1缺失主要通過增強(qiáng)Fth1和Slc3a2等鐵死亡調(diào)控基因的表達(dá)來減少CD8⁺T細(xì)胞的鐵死亡。

5)       Pcif1 缺乏可增強(qiáng) PD-1 阻斷和 CAR-T 細(xì)胞療法的效果

研究發(fā)現(xiàn)系統，T細(xì)胞中Pcif1的缺失通過抑制鐵死亡并增強(qiáng)CD8+ T細(xì)胞的激活增強，顯著提升了抗腫瘤免疫應(yīng)答。在小鼠模型中交流等，Pcif1條件性敲除小鼠的腫瘤對抗PD-1免疫治療的敏感性顯著增強(qiáng)更加廣闊，表現(xiàn)為腫瘤生長抑制、生存期延長及腫瘤浸潤CD8⁺T細(xì)胞增多提高。進(jìn)一步研究表明可以使用，Pcif1缺失通過m?A_m甲基轉(zhuǎn)移酶活性調(diào)控Fth1、Slc3a2等基因的翻譯紮實，減少鐵死亡并增強(qiáng)T細(xì)胞效應(yīng)功能效高化。在CAR-T細(xì)胞治療中新體系，Pcif1敲除的CD8⁺CAR-T細(xì)胞（尤其是靶向CD19的CAR-T）在LLC-hCD19、MC38-hCD19等腫瘤模型中表現(xiàn)出更強(qiáng)的抑瘤活性創造，其機(jī)制與鐵死亡抑制及效應(yīng)因子IFNγ不難發現、TNF、Gzmb分泌增加相關(guān)設備製造。挽救實(shí)驗(yàn)證實(shí)發展需要，下調(diào)Fth1或Slc3a2可逆轉(zhuǎn)Pcif1敲除CAR-T細(xì)胞的鐵死亡特征并減弱其抗腫瘤效果，表明Pcif1通過調(diào)控鐵死亡通路增強(qiáng)CD8⁺T細(xì)胞功能管理。

6)       T 細(xì)胞中PCIF1 的低表達(dá)可增強(qiáng)對 ICI 和 CAR-T 療法的敏感性

研究人員發(fā)現(xiàn)重要組成部分，黑色素瘤患者腫瘤浸潤CD8⁺T細(xì)胞中PCIF1低表達(dá)提示對ICI治療反應(yīng)更佳；B細(xì)胞惡性腫瘤患者治療前T細(xì)胞PCIF1低表達(dá)者接受抗CD19 CAR-T治療后生存期顯著延長趨勢；口腔鱗狀細(xì)胞癌患者中有力扭轉，抗PD-1治療應(yīng)答者的淋巴細(xì)胞浸潤區(qū)PCIF1表達(dá)顯著低于無應(yīng)答者，且其腫瘤微環(huán)境中CD8⁺T細(xì)胞和GzmB陽性細(xì)胞顯著增多一站式服務。PCIF1通過調(diào)控腫瘤微環(huán)境中浸潤性細(xì)胞毒性CD8⁺T細(xì)胞數(shù)量影響免疫治療效果廣度和深度。

三、         結(jié)論

該項(xiàng)研究揭示了PCIF1通過m6A_m修飾調(diào)控CD8⁺T細(xì)胞活化和鐵死亡的分子機(jī)制引領作用，并證明了PCIF1敲除能夠顯著增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)和免疫療法的效果加強宣傳。這一發(fā)現(xiàn)不僅為理解表觀轉(zhuǎn)錄組在免疫調(diào)控中的作用提供了新視角，還為開發(fā)新型癌癥免疫療法提供了重要的理論依據(jù)和潛在靶點(diǎn)用的舒心。未來的研究將進(jìn)一步探索PCIF1的臨床應(yīng)用價值技術發展，推動免疫療法在癌癥治療中的突破。