一、 解剖新生大鼠的脊髓組織
1. 用溫?zé)岬纳睇}水擦拭P2天的新生鼠特征更加明顯;
2. 用70%乙醇沖洗P2新生鼠大力發展;
3. 分離脊髓至關重要,放入裝有L-15溶液的培養(yǎng)皿中對外開放;
4. 剝離脊膜效果較好,轉(zhuǎn)移脊髓到裝有L-15溶液的培養(yǎng)皿中增強。
二重要作用、 制備混合膠質(zhì)細(xì)胞群
1. 清洗所有P2新生鼠的脊髓組織;
2. 把脊髓剪成小塊設計能力;
3. 加入新鮮的DMEMwan全培養(yǎng)基4-5ml品牌,吹打10-15次;
4. 用100um的濾器過濾更為一致;
5. 離心2500RCF/5min/4℃等形式。
三、 種植混合膠質(zhì)細(xì)胞群
1. 4個(gè)P2新生鼠脊髓組織混合細(xì)胞群種到一個(gè)T-75培養(yǎng)瓶中研究與應用;
2. 第5天全量換液飛躍,之后每3天全量換液。
四全面協議、 原代小膠質(zhì)細(xì)胞的分離和培養(yǎng)
1. 2-3周重要部署,當(dāng)混合的細(xì)胞群長滿T-75培養(yǎng)瓶底;
2. 在37℃以150rps的速度搖動(dòng)T-75培養(yǎng)瓶2小時(shí);
3. 用移液管從所有T-75培養(yǎng)瓶中收集培養(yǎng)基工具,不要破壞培養(yǎng)瓶表面的星形膠質(zhì)細(xì)胞層的過程中;
4. 離心2500RCF/5min/4℃發展契機;
5. 吸取上清液廣泛關註,將沉淀重懸于1 ml小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基中促進進步;
6. 計(jì)數(shù);
7. 種植小膠質(zhì)細(xì)胞優勢領先。
五迎來新的篇章、 代表性結(jié)果
