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新生大鼠脊髓來源的小膠質(zhì)細(xì)胞分離和培養(yǎng)

更新時(shí)間:2025-07-09      點(diǎn)擊次數(shù):70

一、 解剖新生大鼠的脊髓組織

1. 用溫?zé)岬纳睇}水擦拭P2天的新生鼠特征更加明顯;

2. 用70%乙醇沖洗P2新生鼠大力發展;

3. 分離脊髓至關重要,放入裝有L-15溶液的培養(yǎng)皿中對外開放;

4. 剝離脊膜效果較好,轉(zhuǎn)移脊髓到裝有L-15溶液的培養(yǎng)皿中增強。


二重要作用、 制備混合膠質(zhì)細(xì)胞群

1. 清洗所有P2新生鼠的脊髓組織;

2. 把脊髓剪成小塊設計能力;

3. 加入新鮮的DMEMwan全培養(yǎng)基4-5ml品牌,吹打10-15次;

4. 用100um的濾器過濾更為一致;

5. 離心2500RCF/5min/4℃等形式。


三、 種植混合膠質(zhì)細(xì)胞群

1. 4個(gè)P2新生鼠脊髓組織混合細(xì)胞群種到一個(gè)T-75培養(yǎng)瓶中研究與應用;

2. 第5天全量換液飛躍,之后每3天全量換液。


四全面協議、 原代小膠質(zhì)細(xì)胞的分離和培養(yǎng)

1. 2-3周重要部署,當(dāng)混合的細(xì)胞群長滿T-75培養(yǎng)瓶底;

2. 在37℃以150rps的速度搖動(dòng)T-75培養(yǎng)瓶2小時(shí);

3. 用移液管從所有T-75培養(yǎng)瓶中收集培養(yǎng)基工具,不要破壞培養(yǎng)瓶表面的星形膠質(zhì)細(xì)胞層的過程中;

4. 離心2500RCF/5min/4℃發展契機;

5. 吸取上清液廣泛關註,將沉淀重懸于1 ml小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基中促進進步;

6. 計(jì)數(shù);

7. 種植小膠質(zhì)細(xì)胞優勢領先。


五迎來新的篇章、 代表性結(jié)果

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