一、服務(wù)介紹

　　大量的研究表明線粒體與細胞凋亡密切相關(guān)，其中線粒體跨膜電位（MMP）的下降平臺建設，被認為是細胞凋亡級聯(lián)反應(yīng)過程中早發(fā)生的事件之一。它發(fā)生在細胞核凋亡特征（染色質(zhì)濃縮貢獻力量、DNA斷裂）出現(xiàn)之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰使用，則細胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。

　　二發行速度、實驗原理

　　JC-1是一種碳氰化合物類陽離子熒光染料更加堅強，可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1在細胞內(nèi)以聚合體和單體兩種不同的物理形式存在性能，分別處于不同的熒光發(fā)射峰初步建立。當(dāng)JC-1濃度低或膜電位水平低時，主要以單體形式存在供給，激發(fā)波長為527nm的方法，呈綠色熒光；當(dāng)JC-1濃度升高或線粒體膜電位水平較高時進行探討，形成聚合物落到實處，發(fā)出紅色的熒光，激發(fā)波長為590nm十分落實。當(dāng)細胞發(fā)生凋亡時倍增效應，線粒體跨膜電位被去極化，JC-1從線粒體內(nèi)釋放製造業，紅光強度減弱優化服務策略，以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光，根椐這一特征就可以檢測線粒體膜電位的變化發展基礎。

　　三兩個角度入手、實驗流程

　　1.細胞培養(yǎng)；

　　2.用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細胞凋亡同期，同時設(shè)立陰性依照組合陽性對照組創新為先，收集細胞；

　　3.用PBS洗滌細胞三次科普活動，收集不多于1×106的細胞創新延展；

　　4.取100μL10×IncubationBuffer加900μL滅菌去離子水稀釋成1×IncubationBuffer，混勻并預(yù)熱至37℃長期間；

　　5.吸取500μL1×IncubationBuffer基本情況，加入1μLJC-1，渦旋混勻配成JC-1工作液；

　　6.取500μLJC-1工作液將細胞均勻懸浮力量，37℃我有所應，5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育15~20min。

　　7.室溫離心（2000rpm,5min）收集細胞深入實施，用1×IncubationBuffer洗兩次至關重要；

　　8.吸取500μL10×IncubationBuffer重新懸浮細胞；

　　9.流式細胞儀檢測效果，分析有所應。

　　四、客戶提供

　　細胞株(凍存株或培養(yǎng)好的細胞)合作關系，相關(guān)藥品或MMP檢測試劑盒（可代購）!

　　五著力提升、公司提供

　　實驗步驟、結(jié)果圖傳遞、數(shù)據(jù)結(jié)果和分析報告

　　實驗周期：1-2周融合，具體需要根據(jù)細胞生長情況及實驗內(nèi)容而定。