簡(jiǎn)要描述:原位雜交指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精確定量定位的過(guò)程發展契機。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行體系流動性。上海伊萊博致力于臨床前藥效學(xué)CRO實(shí)驗(yàn)自主研發,有著多年的原位雜交技術(shù)服務(wù)的經(jīng)驗(yàn)
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原位雜交實(shí)驗(yàn)步驟
原位雜交第一天進(jìn)行重新水化和固定緊密協作、預(yù)雜交規定、雜交保障性。
原位雜交第二天進(jìn)行1將探針回收帶動產業發展,放千-20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)2加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1號(hào)
升,60℃十分落實,放置30分鐘必然趨勢,重復(fù)一次。3置換2XSSCT1ml擴大,60℃多樣性,放置15分鐘。4置換0.2XSSCT1ml新格局,60℃明顯,放置30分鐘
重復(fù)一次。5用MABT洗兩次顯示,每次五分鐘創新為先,放在搖床輕輕搖動(dòng)。6室溫下加1ml1:2:7溶液科普活動,時(shí)間為一小時(shí)創新延展。 7 按1:
3000的比例在1∶2:7溶液中加入酶連地高XIN抗體,4C 冰箱過(guò)夜長期間。
原位雜交第三天進(jìn)行1)用1ml含10%熱滅活血清的MABT溶液置換抗體溶液基本情況,放置搖床上25分鐘,然后用1mIMABT置換
25分鐘高端化,再用1mIMABT溶液置換力量,一小時(shí)以上,最后用1mlMABT溶液置換提單產,25分鐘深入實施。2)用1ml 1mM**米唑的Stainino
buffer洗一次,每次放置五分鐘發展空間。3)將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中效果,吸去staining buffer.加上300ulBM Purple AP Substrate(底
物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上錫箔紙以避光,避免搖動(dòng),室溫下顯色足了準備。4)每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開(kāi)
始顯色5)將顯色的胚胎中的底物吸出合作關系,用PBST洗兩三次后加上4%多聚.甲醛固定,拍照。6)4C冰箱保存就能壓製。
我們擁有專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室更合理、精良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人更優美,助理研究員(博士)4人各方面,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學(xué)成效與經驗、轉(zhuǎn)錄組學(xué)適應性、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)稍有不慎、生物化學(xué)重要作用、病理檢測(cè)、基因檢測(cè)等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣最為顯著。通過(guò)高度細(xì)分尤為突出、較好的的服務(wù)平臺(tái),為廣大客戶(hù)提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)環境。目前空間載體,及,涉及臨床醫(yī)學(xué)相對簡便、腫瘤生物學(xué)重要組成部分、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)合作、分子生物學(xué)等生命科學(xué)勃勃生機、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。
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