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穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選實驗:穩(wěn)定表達細(xì)胞株(穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株)指在細(xì)胞中持續(xù)穩(wěn)定表達特定基因或干擾特定基因表達智慧與合力。穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的目的基因質(zhì)粒DNA整合到細(xì)胞染色體上,使細(xì)胞長期穩(wěn)定表達該基因重要的角色。
過表達慢病毒構(gòu)建及包裝實驗:慢病毒(Lentivirus)載體是以 HIV-1 (人類免疫缺陷1型病毒)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體開放要求。具有感染譜廣泛、可以有效感染分裂期和靜止期細(xì)胞平臺建設、長期穩(wěn)定表達外源基因等優(yōu)點服務機製,因此成為導(dǎo)入外源基因的有力工具。現(xiàn)在慢病毒系統(tǒng)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用到各種細(xì)胞系的基因過表達使用、RNA干擾大幅拓展、microRNA研究以及活體動物實驗中。
實時熒光定量PCR實驗 (Quantitative Real-time PCR)是一種在DNA擴增反應(yīng)中效果較好,以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法核心技術體系。
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