簡(jiǎn)要描述:大鼠動(dòng)物髓核細(xì)胞的原代培養(yǎng)原代細(xì)胞(primary cell):是指從機(jī)體的組織(如人組織同時、小鼠組織使用、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞更為一致,稱為原代細(xì)胞。
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大鼠動(dòng)物髓核細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法
頸椎脫臼法處死SD大鼠發展契機。
剃去背毛全過程,75%酒精浸泡5min特點。
從尾椎處剪開皮膚強大的功能,取出腰椎。
盡量剔除附著的肌肉服務好,用含2%雙抗的PBS沖洗3-5次新趨勢。
分離椎節(jié)反應能力,切開纖維環(huán)分離凝膠狀髓核,將凝膠狀髓核置于PBS中沖洗 3 次學習,去除血跡結構重塑,剪碎髓核組織呈 1mm3大小,移至離心管后加入5倍體積的1.5%Ⅱ型膠原酶應用優勢,37℃搖床消化2h高質量發展。
消化結(jié)束 ,20%FBS終止消化高效節能,100um濾網(wǎng)過(guò)濾影響力範圍,1000r/min 離心 5min,棄上清后DMEM/F12 重懸新創新即將到來,按 1×105/ml接種于培養(yǎng)板邁出了重要的一步,加入含1%雙抗和 15% FBS 的 DMEM/F12,置于37 ℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)創造性。
4 d后換液,以后每3天換 液 1 次道路,細(xì)胞達(dá) 90% 融合后傳代規模設備。
大鼠動(dòng)物髓核細(xì)胞的原代培養(yǎng)評(píng)價(jià)
原代細(xì)胞(primary cell):是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織指導、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞競爭力,稱為原代細(xì)胞。
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