實(shí)驗(yàn)步驟

1. 樣品準(zhǔn)備

a. 細(xì)胞上清樣品，需將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞消化離心取上清即可（如800g導向作用，5分鐘）顯示。

b. 血清樣品，將全血收集至不含抗凝劑的試管內(nèi)真正做到，在室溫下放置1小時(shí)科普活動，待全血自然凝固并析出血清后，4℃約1500g離心10分鐘強化意識，取黃色上清即得血清長期間。

c. 血漿樣品，將全血收集至含抗凝劑的試管內(nèi)現場，混勻后置冰上高端化，4℃約1500g離心10分鐘，取黃色或淡黃色上清即得血漿不久前。

2. 確定樣品測(cè)試組用上了、標(biāo)準(zhǔn)品和空白組組所需的微孔條數(shù)量提升行動，每個(gè)濃度做兩個(gè)平行重復(fù)能力建設，從支架上取出對(duì)應(yīng)數(shù)量的微孔條關註，剩余儲(chǔ)存在箔袋中，密封后在4℃儲(chǔ)存無障礙。

3. 配制對(duì)應(yīng)濃度的捕獲抗體溶液連日來、檢測(cè)抗體溶液、包被液認為、洗滌液系統、樣品稀釋液、顯色液重要意義、終止液交流等、鏈霉親和素-HRP（若使用試劑盒則沒(méi)有此步驟或按試劑盒要求配制）。

4. 每孔加入100μL 捕獲抗體溶液規劃，用封板膜覆蓋提高，4℃孵育過(guò)夜，過(guò)夜后舍棄舍板內(nèi)溶液進入當下。

5. 每孔加入300-400μL洗滌液清洗五次紮實，且最后一次置于厚吸水紙上拍干（若使用試劑盒則沒(méi)有步驟4和5）。

6. 用樣品稀釋液按照1:5, 1:10, 1:50, 1:100, 1:1000, 1:2000稀釋樣品新體系，以此確定樣品IL-2的最佳檢測(cè)濃度投入力度。

7. 配制梯度濃度的IL-2蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，將工作濃度設(shè)置為1200pg/mL, 600pg/mL, 300pg/mL, 150pg/mL, 75pg/mL, 37.5pg/mL, 18.75pg/mL尤為突出，9.38pg/mL規定，以此濃度來(lái)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

8. 分別將樣品空間載體、標(biāo)準(zhǔn)品供給、樣品稀釋液按照100μL/孔加入相應(yīng)孔中作為標(biāo)測(cè)試組、標(biāo)準(zhǔn)品組經驗分享、空白組解決方案。

9. 將偶聯(lián)sws的抗人IL-2抗體按照50μL/孔加入所有孔中，用封板膜覆蓋有力扭轉，室溫避光孵育2小時(shí)上高質量。

10. 每孔加入300-400μL洗滌液洗板五次，且最后一次置于厚吸水紙上拍干廣度和深度。

11. 在所有孔加入100μL稀釋后的鏈霉親和素-HRP深入交流，用封板膜覆蓋，室溫避光孵育1小時(shí)加強宣傳。

12. 每孔加入300-400μL洗滌液洗板五次臺上與臺下，且最后一次置于厚吸水紙上拍干用的舒心。

13. 在所有孔中加入100μL TMB顯色液。用封板膜覆蓋集聚效應，室溫避光孵育30min集成。

14. 在所有孔中加入終止液50μL，混勻后立即測(cè)量A450值互動講。

15. 計(jì)算每一組重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的平均吸光度值穩定性。重復(fù)次數(shù)應(yīng)在平均值的20%以內(nèi)。

16. 繪制IL-2標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線過程中。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)去突破，A450值為縱坐標(biāo)，以平滑線連接各標(biāo)準(zhǔn)品的坐標(biāo)點(diǎn)達到。通過(guò)樣品的吸光度值和標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品的相應(yīng)濃度智能設備。