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簡要描述：質(zhì)粒轉(zhuǎn)化 將質(zhì)粒 DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過程稱為轉(zhuǎn)化（ Transformation ）。此感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀（感受態(tài)細(xì)菌的制備集聚效應，見前）。質(zhì)粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復(fù)合物黏附于細(xì)菌表面物聯與互聯，經(jīng) 42℃ 短時間熱沖擊處理，促進(jìn)細(xì)胞吸收 DNA 復(fù)合物改造層面。在豐富培養(yǎng)基上生長數(shù)小時后供給，球狀細(xì)胞復(fù)原并分lie增殖。
更新時間：2024-06-17廠商性質(zhì)：代理商訪 問 量：716產(chǎn)品分類
Product Category詳細(xì)介紹
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將質(zhì)粒 DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過程稱為轉(zhuǎn)化（ Transformation ）經驗分享。此感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀（感受態(tài)細(xì)菌的制備解決方案，見前）。質(zhì)粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復(fù)合物黏附于細(xì)菌表面不難發現，經(jīng) 42℃ 短時間熱沖擊處理貢獻法治，促進(jìn)細(xì)胞吸收 DNA 復(fù)合物設備製造。在豐富培養(yǎng)基上生長數(shù)小時后發展需要，球狀細(xì)胞復(fù)原并分lie增殖。被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌中管理，外源基因得到表達(dá)重要組成部分。在選擇性培養(yǎng)平板上，可選出所需的轉(zhuǎn)化子（即含有質(zhì)粒 DNA 的細(xì)菌）合作。鈣處理的感受態(tài)細(xì)胞勃勃生機，一般每微克 DNA 能獲得 10 5 ～ 10 6 個轉(zhuǎn)化子。除化學(xué)方法轉(zhuǎn)化細(xì)菌外極致用戶體驗，還有電穿孔法（ Electroporation ）提供有力支撐，其轉(zhuǎn)化率可高達(dá) 10 9 ～ 10 10 個轉(zhuǎn)化子 /μg 質(zhì)粒 DNA 。
二建議、實驗器材
1.培養(yǎng)皿
2.恒溫培養(yǎng)箱
三品率、試劑
1.LB 培養(yǎng)基
2.選擇性 LB 瓊脂培養(yǎng)平板（含氨芐qms，終濃度為 50μg/ml ）
3.氨芐qms 100 mg/ml
4.宿主細(xì)菌：經(jīng) 100 mmol/L CaCl 2 處理的感受態(tài)細(xì)菌 DH5α
四不斷發展、操作步驟
1積極影響、取50μL大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，加入適量質(zhì)粒（體積不得超過4μL）冰浴30min后42℃熱激90s 緊密協作，馬上放回冰上越來越重要，冰浴2min ；
2、加400μLLB培養(yǎng)基醒悟，于37℃搖床慢搖振蕩培養(yǎng)45-60min數據顯示；
3、取50-100μL涂在含有氨芐qms（100μg/mL）的LB固體培養(yǎng)基上也逐步提升，37℃倒置培養(yǎng)過夜達到。
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