簡要描述:實時熒光定量PCR技術服務,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。上海伊萊博致力于臨床前藥效學CRO實驗環境,有著多年的實時熒光定量PCR技術的經(jīng)驗。
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一長期間、RNA的提取
二、DNase|消化樣品RNA 中的DNA
三現場、RNA瓊脂糖凝膠電泳
四全過程、RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA
Real-Time PCR引物設計的要求
1Tm=55~65℃
2 GC=30~80%
3 PCR擴增產(chǎn)物長度:引物的產(chǎn)物大小不要太大,一般在80~300 bp之間都可探討。
4 引物的退火溫度要高不負眾望,一般要在60 ℃以上。
五調解製度、cDNA與引物質(zhì)量檢測
選擇特異性好精準調控,擴增效率高的引物作為實時熒光使用引物。
六應用的因素之一、利用相對定量的方法分析目的基因表達量的情況:
常用的看家基因有B-actin解決,GAPDH,18S rRNA
七敢於監督、定量PCR檢測
八幅度、擴增曲線和溶解曲線
溶解曲線全部為單峰表明為特異性擴增,熒光擴增曲線可以分成三個階段;熒光背暑信號階段重要的作用,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期貢獻。
我們擁有專業(yè)的實驗室、精良的實驗設備和經(jīng)驗豐富的科研技術人員穩中求進。技術團隊包括研究員(博士后)2人統籌,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人適應性,主要致力于基因組學堅實基礎、轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學重要作用、代謝組學等地、生物化學、病理檢測尤為突出、基因檢測等技術在科研中的應用與推廣規定。通過高度細分、較好的的服務平臺空間載體,為廣大客戶提供了完善的技術解決方案和服務高質量。目前,及重要組成部分,涉及臨床醫(yī)學流程、腫瘤生物學、免疫學、細胞生物學深刻變革、分子生物學等生命科學結論、醫(yī)學等諸多領域。
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