RT-PCR實驗

簡要描述：RT-PCR實驗（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）是將RNA的反轉(zhuǎn)錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增（PCR）相結(jié)合的技術(shù)求索。

更新時間：2024-05-06
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RT—PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）是將RNA的反轉(zhuǎn)錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增（PCR）相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用，從RNA合成cDNA集成應用，再以cDNA為模板探討，在DNA聚合酶作用下擴增合成目的片段。RT—PCR技術(shù)靈敏而且用途廣泛高效流通，可用于檢測細(xì)胞中基因表達(dá)水平調解製度、細(xì)胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作為模板的RNA可以是總RNA功能、mRNA或體外轉(zhuǎn)錄的RNA產(chǎn)物應用的因素之一。無論使用何種RNA，關(guān)鍵是確保RNA中無RNA酶和基因組DNA的污染預期。用于反轉(zhuǎn)錄的引物可視實驗的具體情況選擇隨機引物敢於監督、Oligo dT及基因特異性引物中的一種。對于短的不具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的真核細(xì)胞mRNA結構，3種都可重要的作用。

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