所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)預期，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程幅度，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法結構。
檢測(cè)方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過(guò)量SYBR熒光染料貢獻，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后規模最大，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào)統籌，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步最深厚的底氣。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線(xiàn)圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線(xiàn)圖（單一峰圖表明PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的單一性）
2.TaqMan探針?lè)ǎ?/span>
探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收堅實基礎；PCR擴(kuò)增時(shí)稍有不慎，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離等地，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)最為顯著，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成保供，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步自行開發。
服務(wù)流程
1.客戶(hù)認(rèn)真寫(xiě)好訂單，提供待檢基因相關(guān)信息責任；
2.簽訂技術(shù)服務(wù)合同應用情況，支付預(yù)付款（30-50%)；
3.設(shè)計(jì)合成定量PCR引物（或客戶(hù)提供文獻(xiàn)引物委托本公司合成）組建；
4.DNA/RNA的抽提表現、定量、RNA反轉(zhuǎn)錄深刻變革；
5.PCR預(yù)實(shí)驗(yàn)結論，主要檢測(cè)引物的特異性和擴(kuò)增效率；
6.正式定量實(shí)驗(yàn)：對(duì)所有樣品上機(jī)檢測(cè)質生產力；
7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)分析適應性強，形成報(bào)告。