分子實驗-PCR
分子實驗-PCR實驗的原理是DNA分子在電場中會向正極方向移動優勢與挑戰。不同長度的DNA由于受到凝膠介質(zhì)的阻力不同，表現(xiàn)為不同的遷移率而被分開解決方案。
1.試劑
PCR產(chǎn)物趨勢，TAE電泳緩沖液，1000x溴化乙錠儲存液上高質量，電泳級瓊脂糖一站式服務，DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)
2.實驗準(zhǔn)備
配制TAE電泳緩沖液(50x儲存液，pH約8.5: Tris 堿242g 57.1ml冰已酸攻堅克難，37.2g Na2EDTA.2H2O，dd water定容至lL)顯示，6x加樣緩沖液(0.25%溴酚藍(lán)雙向互動，40%蔗糖水溶液) ; 1.5ml 離心管裝入鋁制飯|盒(滅菌)、移液器吸頭裝入相應(yīng)的吸頭盒(滅菌)設計能力。
3.操作步驟
(1)稱取0.4g瓊脂糖粉品牌，放入三角瓶，加入50ml TAE電泳緩沖液(1x)更為一致，放入微波爐中燒開( lmin)等形式。注意觀察燒瓶中的瓊脂糖粉末，待*熔化后停止微波爐(切不可讓膠溶液溢出到微波爐中! )品率。
(2)戴上線手套相貫通，從微波爐中取出三角瓶，置桌面上冷卻致不燙手(約50-60°C)積極影響。
(3)把梳子插到凝膠灌制模具的正確位置后緩緩倒入膠溶液自動化方案。膠溶液倒至與模具的矮邊緣相平即可，不要把膠溶液溢到外面越來越重要。在桌面上靜置10-20分鐘待膠*凝固線上線下。(剩 下的膠溶液封口后留待以后再熔化使用)。
(4)在水平電泳槽中加滿1xTAE電泳緩沖液醒悟。根據(jù)電泳槽的長度把電泳儀的電壓調(diào)至170V(10V/cm)數據顯示，注意正負(fù)電極的位置連接正確。
(5)待膠*凝固后( 15-20分鐘)也逐步提升，小心拔出梳子記得牢。用手指捏住模具兩側(cè)的高邊緣取出模具和凝膠放入電泳槽中間的平臺上，凝膠要沒入電泳液中重要的作用。凝膠上有樣品孔的側(cè)要朝向電泳槽的負(fù)極蓬勃發展。
(6)在凝膠上選擇相鄰的加樣孔。用10μl 的吸液頭分別將管中的樣品加入凝膠的加樣孔中(如果需要時積極回應，在相鄰的加樣孔中加入1.5-3ul DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)物)重要性。
加樣時持移液器的手以肘部固定在桌上又進了一步，用另一只手扶住這只手的手腕，以減少移液器的抖動多元化服務體系∫巹?？吹剿{(lán)色的樣品吸管尖頭伸進(jìn)加樣孔后(不能伸得太深，以免穿破凝膠的底部)緩緩將藍(lán)色的樣品壓入加樣孔中深度。切不可使藍(lán)色樣品流到孔外帶動擴大。
(7)打開電源開關(guān)，樣品將形成條藍(lán)色的橫帶 向前移動 (如果發(fā)現(xiàn)藍(lán)色向后移動開拓創新，立即關(guān)閉電源持續發展，調(diào)換電極)。電泳將進(jìn)行約30min促進善治。
(8)當(dāng)藍(lán)色的溴酚藍(lán)遷移到距凝膠邊緣1cm時擴大，關(guān)閉電源。取出模具和凝膠發揮效力。放入凝膠成像系統(tǒng)中拍照規模設備。
更新時間：2024-07-31
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